黄芩愈伤组织诱导条件的优化.PDF
http://www.100md.com
2006年2月23日
第1页 |
参见附件(104KB,3页)。
黄芩愈伤组织诱导条件的优化3
吴晓玲 ,胡海英 ,王 俊 ,杨 明
(宁夏大学生命科学学院 ,宁夏 银川 750021)
摘要:本试验以黄芩的子叶、真叶和下胚轴为外植体在不同激素组合的 MS培养基上诱导愈伤组织。结果表明:
①诱导黄芩愈伤组织的最好外植体为真叶; ②在不同配方培养基中 ,诱导愈伤组织的最适培养基配方为 MS + 2 ,4 - D(0. 5mg L) + 6 - BA(1mg L) + NAA(0. 5mg L) 。
关键词:黄芩; 组织培养; 愈伤组织
中图分类号:S567. 7 +
9 文献标识码:A 文章编号:1002 - 204X(2005) 01 - 0008 - 03
黄芩( Scutel laria barcaleasis Georgi)为唇形科黄芩属植物 ,其
干燥根是我国的传统中药材 ,最早收载于《神农本草经》 ,被列为
草根药的上品。中医认为黄芩有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎
的功效[ 1 ]。药理试验还证明黄芩具有明显的抗前列腺增生作用 ,很可能成为理想的抗前列腺增生药物[ 2 ]。近几年来 ,人们发现黄
芩的有效成分黄芩甙在治疗艾滋病和癌症方面具有较好的效果 ,因此 ,国内外对于黄芩的需求量日益加大。但是 ,我国的野生黄
芩资源由于过度垦挖其生产量日趋下降 ,有的产区种群已濒临灭
绝 ,人工栽培作为黄芩生产的主要途径 ,又因我国地形、地理及气
候等条件的限制而成活率较低 ,不能进行规模化生产 ,这种状况
不仅不能满足市场对黄芩的需求 ,同时大大限制了黄芩甙的深度
开发和利用。因此 ,利用组织培养技术对黄芩进行无性快繁 ,加
快黄芩的生产和次生代谢物质的提取已迫在眉睫。
有关黄芩的组织培养已有报道[ 2 ,3 ]
,丁如贤已成功利用黄芩
下胚轴及茎段诱导出丛生芽。黄芩愈伤组织作为无性繁殖和细
胞悬浮培养的基础 ,相关研究工作尚未见报道。为了探索黄芩诱
导愈伤组织的最佳培养基配比及选取最佳外植体 ,本试验采用黄
芩无菌的子叶、真叶和下胚轴进行培养 ,为建立稳定高产的黄芩
次生代谢产物生产体系奠定理论与技术基础。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
本试验采用的外植体为子叶、真叶和下胚轴。试验前 3 周取
黄芩的种子进行外植体的预培养。
1. 2 试验设计
基本培养基为 MS培养基。其中琼脂 10g L ,蔗糖 30g L ,培
养基的pH值 5. 8 ,所选用激素为 2 ,4 - D(2 ,4 - 二氯苯氧乙酸) 、NAA(萘乙酸) 、 6 - BA(6 - 苄基腺嘌呤) ,并设置不同的处理如表
1、表 2 所示。
表 1 子叶诱导愈伤组织的激素配比
激素(mg L) M1 M2 M3 M4 M5 M6
2 ,4 - D 0. 5 0. 5 0. 5 0. 0 0. 0 0. 5
6 - BA 1. 0 1. 0 0. 0 1. 0 1. 0 0. 0
NAA 0. 5 0. 0 0. 0 0. 0 0. 5 0. 5
表 2 真叶和下胚轴诱导愈伤组织的激素配比
激素(mg L) M1 M2 M3 M4
2 ,4 - D 0. 5 0. 5 0. 5 1. 0
6 - BA 1. 0 1. 0 0. 0 0. 0
NAA 0. 5 0. 0 0. 0 0. 0
1. 3 试验方法
1. 3. 1 外植体的消毒 将采下的子叶、真叶、下胚轴用清水冲
洗 ,然后将材料置于超净工作台上 ,用 75 %乙醇浸泡 3 秒(以倒
入
收稿日期:2004 - 07 - 01
3本试验为宁夏回族自治区教育厅资助项目部分内容。
求。花葶生长量最大的品种 3 距三级标准的 75cm 还差 15~
29cm。有必要对彩色马蹄莲的温室切花等级标准进行探讨。品
种 3 第 7 天花葶基部的粗度差数值排序最后 ,而第 12 天时又迅
速跃居第 1 位 ,比品种 4 的同期粗度差数值高出 1. 2 倍;这可能
是栽培期、商品花运输期花葶较易出现倒伏的原因之一。
3. 3 对品种1、品种2 的瓶插寿命观察发现 ,水插寿命长的品种
不一定耐离子协迫的能力就强。彩色马蹄莲的最佳瓶插离子溶
液有待于进一步试验。
参考文献:
[1 ] 赵培飞 ,吴丽芳 ,郑凌 ,等. 云南彩色马蹄莲的生产与发展
前景[J ] .湖南农业科学 ,2002 , (3) :69 - 70
[2 ] 高俊平 ,等. 观赏植物采后生理与技术[M] .中国农业大学
出版社 ,2002 ,8
[3 ] 陈静 ,程智慧 ,张丽. 保鲜剂对马蹄莲切花瓶插期的生理影
响[J ] . 西北农业大学学报 ,2000 , (Vol 28) 6 , 96 - 99
责任编辑:褚庆芳
8 2005年第 1 期 宁夏农林科技
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.乙醇浸过叶片后立即倒出为宜) ,再用无菌水冲洗 2~3 次 ......
吴晓玲 ,胡海英 ,王 俊 ,杨 明
(宁夏大学生命科学学院 ,宁夏 银川 750021)
摘要:本试验以黄芩的子叶、真叶和下胚轴为外植体在不同激素组合的 MS培养基上诱导愈伤组织。结果表明:
①诱导黄芩愈伤组织的最好外植体为真叶; ②在不同配方培养基中 ,诱导愈伤组织的最适培养基配方为 MS + 2 ,4 - D(0. 5mg L) + 6 - BA(1mg L) + NAA(0. 5mg L) 。
关键词:黄芩; 组织培养; 愈伤组织
中图分类号:S567. 7 +
9 文献标识码:A 文章编号:1002 - 204X(2005) 01 - 0008 - 03
黄芩( Scutel laria barcaleasis Georgi)为唇形科黄芩属植物 ,其
干燥根是我国的传统中药材 ,最早收载于《神农本草经》 ,被列为
草根药的上品。中医认为黄芩有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎
的功效[ 1 ]。药理试验还证明黄芩具有明显的抗前列腺增生作用 ,很可能成为理想的抗前列腺增生药物[ 2 ]。近几年来 ,人们发现黄
芩的有效成分黄芩甙在治疗艾滋病和癌症方面具有较好的效果 ,因此 ,国内外对于黄芩的需求量日益加大。但是 ,我国的野生黄
芩资源由于过度垦挖其生产量日趋下降 ,有的产区种群已濒临灭
绝 ,人工栽培作为黄芩生产的主要途径 ,又因我国地形、地理及气
候等条件的限制而成活率较低 ,不能进行规模化生产 ,这种状况
不仅不能满足市场对黄芩的需求 ,同时大大限制了黄芩甙的深度
开发和利用。因此 ,利用组织培养技术对黄芩进行无性快繁 ,加
快黄芩的生产和次生代谢物质的提取已迫在眉睫。
有关黄芩的组织培养已有报道[ 2 ,3 ]
,丁如贤已成功利用黄芩
下胚轴及茎段诱导出丛生芽。黄芩愈伤组织作为无性繁殖和细
胞悬浮培养的基础 ,相关研究工作尚未见报道。为了探索黄芩诱
导愈伤组织的最佳培养基配比及选取最佳外植体 ,本试验采用黄
芩无菌的子叶、真叶和下胚轴进行培养 ,为建立稳定高产的黄芩
次生代谢产物生产体系奠定理论与技术基础。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
本试验采用的外植体为子叶、真叶和下胚轴。试验前 3 周取
黄芩的种子进行外植体的预培养。
1. 2 试验设计
基本培养基为 MS培养基。其中琼脂 10g L ,蔗糖 30g L ,培
养基的pH值 5. 8 ,所选用激素为 2 ,4 - D(2 ,4 - 二氯苯氧乙酸) 、NAA(萘乙酸) 、 6 - BA(6 - 苄基腺嘌呤) ,并设置不同的处理如表
1、表 2 所示。
表 1 子叶诱导愈伤组织的激素配比
激素(mg L) M1 M2 M3 M4 M5 M6
2 ,4 - D 0. 5 0. 5 0. 5 0. 0 0. 0 0. 5
6 - BA 1. 0 1. 0 0. 0 1. 0 1. 0 0. 0
NAA 0. 5 0. 0 0. 0 0. 0 0. 5 0. 5
表 2 真叶和下胚轴诱导愈伤组织的激素配比
激素(mg L) M1 M2 M3 M4
2 ,4 - D 0. 5 0. 5 0. 5 1. 0
6 - BA 1. 0 1. 0 0. 0 0. 0
NAA 0. 5 0. 0 0. 0 0. 0
1. 3 试验方法
1. 3. 1 外植体的消毒 将采下的子叶、真叶、下胚轴用清水冲
洗 ,然后将材料置于超净工作台上 ,用 75 %乙醇浸泡 3 秒(以倒
入
收稿日期:2004 - 07 - 01
3本试验为宁夏回族自治区教育厅资助项目部分内容。
求。花葶生长量最大的品种 3 距三级标准的 75cm 还差 15~
29cm。有必要对彩色马蹄莲的温室切花等级标准进行探讨。品
种 3 第 7 天花葶基部的粗度差数值排序最后 ,而第 12 天时又迅
速跃居第 1 位 ,比品种 4 的同期粗度差数值高出 1. 2 倍;这可能
是栽培期、商品花运输期花葶较易出现倒伏的原因之一。
3. 3 对品种1、品种2 的瓶插寿命观察发现 ,水插寿命长的品种
不一定耐离子协迫的能力就强。彩色马蹄莲的最佳瓶插离子溶
液有待于进一步试验。
参考文献:
[1 ] 赵培飞 ,吴丽芳 ,郑凌 ,等. 云南彩色马蹄莲的生产与发展
前景[J ] .湖南农业科学 ,2002 , (3) :69 - 70
[2 ] 高俊平 ,等. 观赏植物采后生理与技术[M] .中国农业大学
出版社 ,2002 ,8
[3 ] 陈静 ,程智慧 ,张丽. 保鲜剂对马蹄莲切花瓶插期的生理影
响[J ] . 西北农业大学学报 ,2000 , (Vol 28) 6 , 96 - 99
责任编辑:褚庆芳
8 2005年第 1 期 宁夏农林科技
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.乙醇浸过叶片后立即倒出为宜) ,再用无菌水冲洗 2~3 次 ......
您现在查看是摘要介绍页,详见PDF附件(104KB,3页)。